Genetická manipulace s ruměnicí pospolnou (Pyrrhocoris apterus)
Publikace ve Frontiers in Physiology popisuje detailní postup jak provádět genetickou manipulaci ruměnic (Pyrrhocoris apterus) pomocí CRISPR-CAS9.
Popis obrázku: Zjednodušené schéma postupu genové editace u ruměnice (Pyrrhocoris apterus) se zvýrazněnými klíčovými kroky.
Ruměnice (Pyrrhocoris apterus) jsou dlouhodobě používány jako excelentní modelový organismus při studiu hmyzí endokrinologie, vývojových mechanismů a při výzkumu denních a sezónních rytmů. Jediným dostupným nástrojem k funkčnímu výzkumu genů ale bylo umlčování pomocí RNA interference. Proto jsme prozkoumali možnosti užití genových manipulací a optimalizovali nezbytné kroky nutné k úspěšné injikaci hmyzích vajíček, optimalizovali detekční postup k nalezení modifikovaných jedinců a vyvinuli postup k identifikaci mutantů v F1 generaci. Naše publikace ve Frontiers in Physiology popisuje detailní protokol používaný k editování genů ruměnic pomocí CRISPR-CAS9. Tento postup je, po určitých modifikacích, aplikovatelný pro další druhy hmyzu.
Kotwica-Rolinska J., Chodakova L., Chvalova D., Kristofova L., Fenclova I., Provaznik J., Wu C., Bertolutti M., Dolezel D. (2019) CRISPR/Cas9 genome editing introduction and optimization in the non-model insect Pyrrhocoris apterus. Frontiers in Physiology 10: 891. DOI: 10.3389/fphys.2019.00891
